1.1、酿酒酵母的生物介绍

酿酒酵母是单细胞，卵圆形或球形，具细胞壁、细胞质膜、细胞核（极微小，常不易见到）、液泡、线粒体及各种贮减物质，如油滴、肝糖等。酿酒酵母生长在麦芽汁琼脂培养基上的酿酒酵母菌落为乳白色，有光泽、平坦、边缘整齐；细胞宽度2.5-10μm，长度4.5 -21μm，长与宽之比为 1 -2，多为圆形、卵圆形或卵形。

酿酒酵母菌含丰富的蛋白质、维生素、矿物质、多糖和许多生物活性物质，有许多完整的酶系，并含有2.5%-10%的核糖核酸（ribose nucleic acid，RNA）。酿酒酵母细胞壁含有丰富的β-1，3-葡聚糖和甘露寡糖（mannan oligosaccharide，MOS），其含量可达到细胞壁干质量的95%左右；酵母细胞原生质中含丰富的小肽；酿酒酵母中含超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）。

（1）菌株：

酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）。

（2）试剂：

斐林试剂、0.2%标准葡萄糖溶液、液化酶、糖化酶、氢氧化钠、甲基蓝溶液、浓硫酸以及粗制复合酶等。

（3）仪器设备：

台式离心机、糖度计、酒精计、恒温水槽、电子天平、灭菌锅、培养箱、磁力搅拌器以及振荡器等。

（4）培养基：

固体斜面完全培养基（YEPD）、酒母培养基、发酵培养基。

将待测菌株经过斜面传代培养验证稳定性后，转到新鲜斜面培养基中培养，接种到种子培养基上培养，当细胞数目达到1x109cell/ml时即对数生长期时，按照发酵培养基体积的15%的接种量，接种到发酵培养基中。

具体操作如下:

（1）菌种在YEPD斜面上30℃活化两次，接种于装有8ml的14oBx种子糖化液的20x20大试管中，30℃培养16-20小时；

（2）将菌液接入装有100ml的14oBx种子糖化液的250ml三角瓶中，30℃，200rmp培养10-12小时；

（3）发酵使用500ml三角瓶，内装255g发酵培养基，当细胞数目达到1X109cell/ml时候即对数生长期时，将二级种子液接种45g到发酵培养基中，装上发酵拴，30℃静置培养；

（4）12小时后用浓硫酸封口，将发酵培养箱温度调整至34℃，静置发酵60小时；

（5）期间每隔12小时称重一次，记下减轻的重量，求二氧化碳的失重量；

（6）发酵完成后可以测定一些数据，比如酒精度、表观糖度、还原糖与酸度等参数值，供后期数据的处理与分析。

三、酿酒酵母的应用方向

酿酒酵母作为单细胞真核生物的代表，发酵工艺成熟，生物安全性高，主要用于燃料乙醇、白酒、葡萄酒、啤酒等的酿造生产中。酿酒酵母活菌、非活性成分及细胞组成成分也已广泛应用于畜牧养殖业和饲料工业。

酵母菌将葡萄糖、果糖、甘露糖等单糖吸入细胞内，在无氧的条件下，经过内酶的作用，把单糖分解为二氧化碳和乙醇，此作用即发酵。

活菌可以作为益生菌或发酵菌剂使用。可以促进动物胃肠道有益菌群的繁殖，改善动物消化道微生态平衡。可以有效吸附肠道病原菌。布拉迪酵母菌株具有天然耐热性，布拉迪酵母菌株耐酸性能良好。布拉迪酵母可以分泌多胺物质（腐胺、精胺和亚精胺），促进动物肠道成熟，增强肠细胞对营养物质的吸收能力。酿酒酵母可以作为发酵菌剂使用，或与其他益生菌配伍，用于饲用原料的发酵处理，提升原料价值。

酿酒酵母非活性形式和细胞组分，可以作为酵母有机微量元素、功能性蛋白原料、免疫增强剂、霉菌毒素吸附剂、抑菌促生长剂使用。酿酒酵母富含蛋白质、核酸、维生素、多糖等营养物质，在诱食、促生长效果方面作用明显，具有替代血浆蛋白粉、鱼粉的潜力。

（1）酿酒酵母作为模式生物在外源基因功能鉴定中的应用

酿酒酵母基因组小，生命周期短，繁殖快速，再加上实验操作上更简易，具有简便的平板影印能力，非常适合遗传周期短，繁殖快速，再加上实验操作上更简易，具有简便的平板影印能力，非常适合遗传学上的分析研究。同时，酿酒酵母具有稳定的单倍体和二倍体细胞，在实验条件下，酿酒酵母的二倍体和单倍体这两种状态可以相互转换。

（2）酿酒酵母作为模式生物在人类基因功能研究中的应用

酿酒酵母作为单细胞真核生物，具有和动植物细胞相似的结构特征，包括细胞核，内质网，高尔基体，线粒体，过氧化物酶体，细胞骨架等，而且其细胞生长发育过程和动植物细胞也有很高的相似性，很多基因在酵母和动植物细胞中是高度保守的。而且，酵母细胞很容易进行生物化学和分子生物学操作，因此，酵母是基因功能研究中常用的模式生物。

酵母富含含维生素B、蛋白质和多种酶，所以菌体制成成酵母片，用于治疗消化不良；还可从酵母菌中提取出用于生产核酸类衍生物、辅酶A.细胞色素C、谷胱甘肽和多种氨基酸的原料。还可用于生产重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）。